TGuide Bacteria Genomic DNA Kit

A-1 Mababang konsentrasyon ng mga cell o virus sa panimulang sample - Pagyamanin ang konsentrasyon ng mga cells o virus.

A-2 Hindi sapat na lysis ng mga sample —Ang mga sample ay hindi pa nahalo nang lubusan sa buffer ng lysis. Iminumungkahi na lubusang ihalo ng pulse-vortexing sa loob ng 1-2 beses. —Kulang ng cell lysis sanhi ng pagbawas ng aktibidad ng proteinase K. —Kulang ng cell lysis o pagkasira ng protina dahil sa hindi sapat na mainit na oras ng pagligo. Iminumungkahi na gupitin ang tisyu sa maliliit na piraso at pahabain ang oras ng pagligo upang alisin ang lahat ng nalalabi sa lysate.

A-3 Hindi sapat na adsorption ng DNA. —Walang ethanol o mababang-porsyento sa halip na 100% etanol ay naidagdag bago ilipat ang lysate sa haligi ng paikutin.

A-4 Ang halaga ng ph ng elution buffer ay masyadong mababa. —Iayos ang pH sa pagitan ng 8.0-8.3.

Natitirang etanol sa mga matatanda.

—May natitirang washing buffer PW sa mga matatanda. Ang etanol ay maaaring alisin sa pamamagitan ng centrifuging ang haligi ng paikutin para sa 3-5 minuto, at pagkatapos ay ilagay sa temperatura ng kuwarto o 50 ℃ incubator para sa 1-2 min.

A-1 Ang sample ay hindi sariwa. —Extract ang isang positibong sample na DNA bilang kontrol upang matukoy kung ang DNA sa sample ay lumala.

A-2 Maling pre-treatment. —Naging sanhi ng labis na likidong paggiling na likido ng nitrogen, muling pagkuha ng kahalumigmigan, o sobrang dami ng sample.

Ang mga pretreatment ay dapat na magkakaiba para sa iba't ibang mga sample. Para sa mga sample ng halaman, siguraduhin na lubusang gumiling sa likidong nitrogen. Para sa mga sample ng hayop, homogenate o lubusang gumiling sa likidong nitrogen. Para sa mga sampol na may mga pader ng cell na mahirap basagin, tulad ng bakterya ng G + at lebadura, iminumungkahi na gumamit ng lysozyme, lyticase o mga mekanikal na pamamaraan upang masira ang mga pader ng cell.

4992201/4992202 Ang Plant Genomic DNA Kit ay gumagamit ng isang pamamaraan na batay sa haligi na nangangailangan ng chloroform para sa pagkuha. Lalo na angkop ito para sa iba't ibang mga sample ng halaman, pati na rin ang dry dry powder. Ang Hi-DNAsecure Plant Kit ay nakabatay din sa haligi, ngunit walang pangangailangan ng pagkuha ng phenol / chloroform, ginagawa itong ligtas at hindi nakakalason. Ito ay angkop para sa mga halaman na may mataas na polysaccharides at nilalaman ng polyphenol. 4992709/4992710 Ang DNAquick Plant System ay gumagamit ng likidong nakabatay sa likido. Ang pagkuha ng phenol / chloroform ay hindi kinakailangan din. Ang pamamaraan ng paglilinis ay simple at mabilis na walang limitasyon para sa mga halimbawang simulang halaga, kaya maaaring ayusin ng mga gumagamit ang halaga nang naaayon ayon sa mga kinakailangan sa pang-eksperimentong. Malaking sukat ng mga fragment ng gDNA ay maaaring makuha na may mataas na ani.

Ang genomic DNA ay nakuha mula sa iba't ibang dami ng mga buong sample ng dugo ng tao ng TIANamp Blood DNA Kit. Ang mga resulta ay sumusunod. Ang mga resulta ay nakalista bilang sanggunian lamang, ang tunay na mga resulta ng pagkuha ay nakasalalay sa mga kondisyon ng mga sample.

Ang pagkuha ng dugo ng dugo ng dugo ay maaaring isagawa gamit ang mga reagent na ibinigay sa dalawang kit na ito sa pamamagitan lamang ng pagbabago ng protokol sa tukoy na tagubilin para sa pagkuha ng dugo ng dugo ng dugo. Ang malambot na kopya ng dugo clot DNA pagkuha ng protokol ay maaaring maibigay kapag humiling.

Suspindihin ang sariwang sample na may 1 ML PBS, normal na asin o TE buffer. Ganap na homogenize ang sample ng isang homogenizer at kolektahin ang namuo sa ilalim ng isang tubo sa pamamagitan ng centrifuging. Itapon ang supernatant, at muling ibigay ang namuo sa 200 μl buffer GA. Ang sumusunod na paglilinis ng DNA ay maaaring isagawa alinsunod sa tagubilin.

Para sa paglilinis ng gDNA sa plasma, serum at mga sample ng likido sa katawan, inirerekumenda ang TIANamp Micro DNA Kit. Para sa paglilinis ng virus gDNA mula sa mga sample ng serum / plasma, inirerekumenda ang TIANamp Virus DNA / RNA Kit. Para sa paglilinis ng gDNA ng bakterya mula sa mga sample ng suwero at plasma, inirerekumenda ang TIANamp Bacteria DNA Kit (dapat isama ang lysozyme para sa positibong bakterya). Para sa mga sample ng laway, inirekomenda ang Hi-Swab DNA Kit at TIANamp Bacteria DNA Kit.

Inirerekomenda ang DNAsecure Plant Kit o DNAquick Plant System para sa pagkuha ng fungal genome. Para sa pagkuha ng lebadura ng genome, inirerekumenda ang TIANamp Yeast DNA Kit (ang lyticase ay dapat na ihanda sa sarili).