RNAclean Kit

Ang A-1 Cell lysis o homogenization ay hindi sapat

---- Bawasan ang paggamit ng sample, dagdagan ang dami ng lysis buffer, dagdagan ang homogenization at oras ng lysis.

A-2 Halimbawang halaga ay masyadong malaki

---- Bawasan ang dami ng ginamit na sample o dagdagan ang halaga ng lysis buffer.

A-1 Hindi sapat na cell lysis o homogenization

---- Bawasan ang paggamit ng sample, dagdagan ang dami ng lysis buffer, dagdagan ang homogenization at oras ng lysis.

A-2 Halimbawang halaga ay masyadong malaki

---- Mangyaring mag-refer sa maximum na kapasidad sa pagproseso.

Ang A-3 RNA ay hindi ganap na na-elute mula sa haligi

---- Matapos idagdag ang RNase-Free na tubig, iwanan ito ng ilang minuto bago mag-centrifuging.

A-4 Ethanol sa eluent

---- Matapos ang banlaw, muling mag-centrifuge at alisin ang washing buffer hangga't maaari.

Ang medium ng A-5 na kultura ng cell ay hindi ganap na natanggal

---- Kapag nangongolekta ng mga cell, mangyaring tiyakin na alisin ang medium ng kultura hangga't maaari.

A-6 Ang mga cell na nakaimbak sa RNAstore ay hindi epektibo na centrifuged

---- Ang density ng RNAstore ay mas malaki kaysa sa average medium medium ng kultura ng cell; kaya dapat dagdagan ang lakas na centrifugal. Iminumungkahi na mag-centrifuge sa 3000x g.

A-7 Mababang nilalaman ng RNA at kasaganaan sa sample

---- Gumamit ng isang positibong sample upang matukoy kung ang mababang-ani ay sanhi ng sample.

A-1 Ang materyal ay hindi sariwa

---- Ang mga sariwang tisyu ay dapat na nakaimbak kaagad sa likidong nitrogen o kaagad na inilagay sa reagent ng RNAstore upang matiyak ang epekto ng pagkuha.

A-2 Halimbawang halaga ay masyadong malaki

---- Bawasan ang halimbawang halaga.

A-3 RNase na kontaminasyonn

---- Bagaman ang buffer na ibinigay sa kit ay hindi naglalaman ng RNase, madali itong mahawahan ang RNase sa panahon ng proseso ng pagkuha at dapat hawakan nang may pag-iingat.

A-4 Polusyon sa electrophoresis

---- Palitan ang buffer ng electrophoresis at siguraduhin na ang mga natupok at Loading Buffer ay walang kontaminasyong RNase.

A-5 Masyadong maraming paglo-load para sa electrophoresis

---- Bawasan ang dami ng sample ng paglo-load, ang paglo-load ng bawat balon ay hindi dapat lumagpas sa 2 μg.

A-1 Halimbawang halaga ay masyadong malaki

---- Bawasan ang halimbawang halaga.

A-2 Ang ilang mga sample ay may mataas na nilalaman ng DNA at maaaring malunasan ng DNase.

---- Magsagawa ng RNase-Free DNase na paggamot sa nakuha na solusyon sa RNA, at ang RNA ay maaaring direktang magamit para sa kasunod na mga eksperimento pagkatapos ng paggamot, o maaaring mas malinis ng mga kit ng paglilinis ng RNA.

Para sa mga glasswares, inihurnong sa 150 ° C sa 4 na oras. Para sa mga lalagyan na plastik, isinasama sa 0.5 M NaOH sa loob ng 10 minuto, pagkatapos ay lubusan itong banlaw ng tubig na walang RNase at pagkatapos ay isteriliser upang ganap na alisin ang RNase. Ang mga reagent o solusyon na ginamit sa eksperimento, lalo na ang tubig, ay dapat na walang RNase. Gumamit ng walang tubig na RNase para sa lahat ng paghahanda na reagent (magdagdag ng tubig sa isang malinis na bote ng baso, idagdag ang DEPC sa isang huling konsentrasyon na 0.1% (V / V), iling magdamag at autoclave).