GMO Crop Extraction & Amplification Kit

Lalo na angkop para sa GMO Crop extraction at transgenic PCR detection.

Ang GMO Crop Extraction & Amplification Kit ay partikular na binuo para sa pagtuklas ng PCR ng mga pananim ng GMO. Ang natatanging buffer ng lysis na nilalaman sa Bahagi A ng kit ay maaaring partikular na mag-lyse ng mga tisyu ng pangunahing mga pananim —— trigo, mais, bigas, koton at toyo, upang palabasin ang mga kaugnay na sangkap tulad ng mga nucleic acid at protina. Ang phenol / chloroform extraction na sinamahan ng tukoy na RNase ay maaaring maglinis ng high-purity genomic DNA na walang mga impurities tulad ng RNA, protein at metal ions. Ang nalinis na DNA ay maaaring mailapat sa kasunod na pagtuklas ng PCR. Ang Bahagi B ng kit ay isang dalawang-sangkap na simpleng sistema ng reaksyon ng PCR na naglalaman ng 2 × GMO PCR Buffer at GMO DNA Polymerase. Ang GMO DNA Polymerase ay isang termostable polymerase na binago ng mga antibodies. Naglalaman ang 2 × GMO PCR Buffer ng iba't ibang mga sangkap tulad ng MgCl2, dNTPs, PCR reaction stabilizer, optimizer at enhancer sa isang konsentrasyon ng 2 × GMO. Mayroon itong mga kalamangan ng mabilis at simpleng operasyon, mataas na pagiging sensitibo, malakas na pagtitiyak, mahusay na katatagan, atbp Maaari itong magamit kasama ng Bahagi A para sa pagtuklas ng GMO ng transgenic PCR.

Pusa Hindi Laki ng Pag-iimpake
4992905 200 rxn

 

 


Detalye ng Produkto

Pang-eksperimentong Halimbawa

FAQ

Mga Tag ng Produkto

Mga Tampok

■ Malapad na kakayahang magamit: Ang kit na ito ay maaaring kumuha ng de-kalidad na genomic DNA mula sa limang pangunahing mga pananim ng GMO.
■ Simple at mabilis: Ang GMO crop genomic DNA bunutan ay maaaring makumpleto sa loob ng 2 oras. Hindi na kailangan para sa malalaking mga palamig na centrifuges, mababang mga kinakailangan para sa mga instrumento at kagamitan. Angkop para sa mabilis na pagkuha ng genomic DNA ng mga pananim ng GMO sa lahat ng antas ng mga institusyon ng pananaliksik.
■ Mataas na kahusayan at pagtitiyak: Ang natatanging buffer ng binago ng antibody na Taq polymerase ay nagsisiguro ng mahusay na pagpapalakas ng polymerase, na mas tiyak kaysa sa normal na Taq polymerase.

Mga Aplikasyon

Maaaring makuha ng kit ang de-kalidad na genomic DNA mula sa pangunahing mga pananim ng GMO tulad ng trigo, mais, bigas, koton at toyo, at magsagawa ng detensyon ng transgenic PCR sa mga pananim ng GMO.

Ang lahat ng mga produkto ay maaaring ipasadya para sa ODM / OEM. Para sa mga detalye,mangyaring i-click ang Customized Service (ODM / OEM)


  • Nakaraan:
  • Susunod:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×
    Experimental Example Pagkuha ng Genomic DNA
    Ang pagkuha ng Genomic DNA ay isinagawa sa 100 mg dahon ng bigas, mais, toyo, koton at trigo, ayon sa pagkakabanggit. Ang eksperimento ay naulit nang dalawang beses. 3 μl DNA mula sa kabuuang 100 μl na eluents ang na-load bawat linya.
    Ang konsentrasyon ng agarose gel ay 2%. Ang electrophoresis ay ginaganap sa ilalim ng 6 V / cm sa loob ng 20 min.
    D15000: TIANGEN D15000 DNA Marker.
    Experimental Example Pagtuklas ng PCR
    Ang Genomic DNA ng bigas, mais, toyo, koton at trigo ay pinalakas, ayon sa pagkakabanggit. Ang eksperimento ay naulit nang dalawang beses. 6 μl mula sa kabuuang 20 μl na reaksyon ng system ang na-load bawat linya.
    Ang konsentrasyon ng agarose gel ay 2%. Ang electrophoresis ay ginaganap sa ilalim ng 6 V / cm sa loob ng 20 min.
    D15000: TIANGEN D15000 DNA Marker.
    Q: Walang mga banda ng pagpapalaki

    Isang-1 na Template

    ■ Naglalaman ang template ng mga impurities ng protina o Taq inhibitors, atbp .—— Linisin ang template ng DNA, alisin ang mga impurities ng protina o i-extract ang template ng DNA na may mga kit ng paglilinis.

    ■ Ang denaturation ng template ay hindi kumpleto —— Naaangkop na taasan ang temperatura ng denaturation at pahabain ang oras ng denaturation.

    ■ Pagwasak ng template —— Muling ihanda ang template.

    A-2 Panimula

    ■ Hindi magandang kalidad ng mga primer ——Re-synthesize ang panimulang aklat.

    ■ Pangunahin na pagkasira ng katawan ——Nag-iipon ng mataas na konsentrasyon ng mga primer sa maliit na dami para sa pangangalaga. Iwasan ang maraming pagyeyelo at pagkatunaw o pangmatagalang 4 ° C cryopreserve.

    ■ Hindi wastong disenyo ng mga primer (hal. Haba ng panimulang hindi sapat, malabo na nabuo sa pagitan ng mga primer, atbp.) -Redesign primers (iwasan ang pagbuo ng primer dimer at pangalawang istraktura)

    A-3 Mg2+konsentrasyon

    ■ Mg2+ masyadong mababa ang konsentrasyon —— Maayos na taasan ang Mg2+ konsentrasyon: I-optimize ang Mg2+ konsentrasyon ng isang serye ng mga reaksyon mula 1 mM hanggang 3 mM na may agwat na 0.5 mM upang matukoy ang pinakamainam na Mg2+ konsentrasyon para sa bawat template at panimulang aklat.

    A-4 Temperatura ng pag-Annealing

    ■ Ang mataas na temperatura ng pagsusubo ay nakakaapekto sa pagbubuklod ng panimulang aklat at template. —— Bawasan ang temperatura ng pagsusubo at i-optimize ang kondisyon na may gradient na 2 ° C.

    A-5 Oras ng pagpapalawak

    ■ Maikling oras ng extension —— Taasan ang oras ng extension.

    T: Maling positibo

    Phenomena: Ipinapakita rin ng mga negatibong sample ang mga target na banda ng pagkakasunud-sunod.

    A-1 Contamination ng PCR

    ■ Tumawid sa kontaminasyon ng pagkakasunud-sunod ng target o mga produktong pampalaki —— Maingat na hindi pipet ang sample na naglalaman ng pagkakasunud-sunod ng target sa negatibong sample o ibubuhos ang mga ito mula sa centrifuge tube. Ang mga reagent o kagamitan ay dapat na autoclaved upang maalis ang mga umiiral na mga nucleic acid, at ang pagkakaroon ng kontaminasyon ay dapat na matukoy sa pamamagitan ng mga eksperimentong negatibong kontrol.

    ■ Reagent na kontaminasyon ——I -quote ang mga reagent at iimbak sa mababang temperatura.

    A-2 Punong Punongr

    ■ Mg2+ masyadong mababa ang konsentrasyon —— Maayos na taasan ang Mg2+ konsentrasyon: I-optimize ang Mg2+ konsentrasyon ng isang serye ng mga reaksyon mula 1 mM hanggang 3 mM na may agwat na 0.5 mM upang matukoy ang pinakamainam na Mg2+ konsentrasyon para sa bawat template at panimulang aklat.

    ■ Hindi wastong disenyo ng panimulang aklat, at ang pagkakasunud-sunod ng target ay may homology na may pagkakasunud-sunod na hindi target. ——Mga muling disenyo ng disenyo.

    Q: Hindi tiyak na paglaki

    Phenomena: Ang mga PCR amplification band ay hindi naaayon sa inaasahang laki, alinman sa malaki o maliit, o kung minsan ay kapwa natukoy na mga partikular na amplification band at mga hindi partikular na amplification band.

    A-1 Panimulang Gabay

    ■ Hindi magandang pagtutukoy ng primer

    ——Re-disenyo ng panimulang aklat.

    ■ Masyadong mataas ang konsentrasyon ng panimulang aklat —— Maayos na taasan ang temperatura ng denaturation at pahabain ang oras ng denaturation.

    A-2 Mg2+ konsentrasyon

    ■ Ang Mg2+ masyadong mataas ang konsentrasyon —— Maayos na bawasan ang konsentrasyon ng Mg2 +: I-optimize ang Mg2+ konsentrasyon ng isang serye ng mga reaksyon mula 1 mM hanggang 3 mM na may agwat na 0.5 mM upang matukoy ang pinakamainam na Mg2+ konsentrasyon para sa bawat template at panimulang aklat.

    A-3 Thermostable polymerase

    ■ Labis na halaga ng enzyme —— Bawasan nang naaangkop ang halaga ng enzyme sa agwat ng 0.5 U.

    A-4 Temperatura ng pag-Annealing

    ■ Ang temperatura ng pagsusubo ay masyadong mababa —— Naaangkop na dagdagan ang temperatura ng pagsusubo o gamitin ang dalawang yugto na pamamaraan ng pagsusubo.

    A-5 PCR cycle

    ■ Napakaraming mga cycle ng PCR —— Bawasan ang bilang ng mga cycle ng PCR.

    Q: Patchy o smear band

    A-1 Panimulang Gabay——Mahihirap na detalye --— Muling idisenyo ang panimulang aklat, baguhin ang posisyon at haba ng panimulang aklat upang mapagbuti ang pagiging tiyak nito; o magsagawa ng nakapugad na PCR.

    A-2 Template DNA

    ——Ang dalisay na template ay hindi puro ——Linisin ang template o kumuha ng DNA na may mga kit sa paglilinis.

    A-3 Mg2+ konsentrasyon

    ——Mg2+ masyadong mataas ang konsentrasyon —— Maayos na bawasan ang Mg2+ konsentrasyon: I-optimize ang Mg2+ konsentrasyon ng isang serye ng mga reaksyon mula 1 mM hanggang 3 mM na may agwat na 0.5 mM upang matukoy ang pinakamainam na Mg2+ konsentrasyon para sa bawat template at panimulang aklat.

    A-4 dNTP

    ——Ang konsentrasyon ng mga dNTP ay masyadong mataas —— Bawasan ang konsentrasyon ng dNTP nang naaangkop

    A-5 temperatura ng pagsusulit

    —— Masyadong mababa ang temperatura ng pagsusubo —— Naaangkop na taasan ang temperatura ng pagsusubo

    A-6 na Pag-ikot

    —— Masyadong maraming mga cycle ——Optimize ang bilang ng cycle

    Q: Gaano karaming template na DNA ang dapat idagdag sa isang 50 μl PCR system na reaksyon?
    ytry
    Q: Paano palakihin ang mahabang mga fragment?

    Ang unang hakbang ay upang piliin ang naaangkop na polymerase. Ang regular na Taq polymerase ay hindi maaaring mag-proofread dahil sa kakulangan ng aktibidad na 3'-5 'exonuc please, at ang hindi pagtutugma ay lubos na mabawasan ang kahusayan ng extension ng mga fragment. Samakatuwid, ang regular na Taq polymerase ay hindi mabisang mapalakas ang mga fragment ng target na mas malaki sa 5 kb. Ang Taq polymerase na may espesyal na pagbabago o iba pang mataas na fidelity polymerase ay dapat mapili upang mapabuti ang kahusayan ng extension at matugunan ang mga pangangailangan ng mahabang fragment amplification. Bilang karagdagan, ang pagpapalaki ng mahabang mga fragment ay nangangailangan din ng kaukulang pagsasaayos ng disenyo ng panimulang aklat, oras ng denaturation, oras ng extension, buffer pH, atbp Karaniwan, ang mga primer na may 18-24 bp ay maaaring humantong sa mas mahusay na ani. Upang maiwasan ang pinsala sa template, ang oras ng denaturation sa 94 ° C ay dapat na mabawasan sa 30 sec o mas mababa bawat cycle, at ang oras na tumaas ang temperatura sa 94 ° C bago ang amplification ay dapat mas mababa sa 1 minuto. Bukod dito, ang pagtatakda ng temperatura ng extension sa halos 68 ° C at pagdidisenyo ng oras ng extension ayon sa rate ng 1 kb / min ay maaaring matiyak na mabisang pagpapalaki ng mahabang mga fragment.

    Q: Paano mapapabuti ang katapatan ng amplification ng PCR?

    Ang rate ng error ng amplification ng PCR ay maaaring mabawasan sa pamamagitan ng paggamit ng iba't ibang mga polymerase ng DNA na may mataas na katapatan. Kabilang sa lahat ng mga Taq DNA polymerases na natagpuan sa ngayon, ang Pfu enzyme ay may pinakamababang rate ng error at pinakamataas na katapatan (tingnan ang kalakip na talahanayan). Bilang karagdagan sa pagpili ng enzyme, ang mga mananaliksik ay maaaring karagdagang bawasan ang rate ng pagbago ng PCR sa pamamagitan ng pag-optimize ng mga kondisyon ng reaksyon, kabilang ang pag-optimize ng komposisyon ng buffer, konsentrasyon ng termostable polymerase at pag-optimize ng numero ng cycle ng PCR.

    Isulat ang iyong mensahe dito at ipadala ito sa amin